TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA TPHCM KHOA KỸ THUẬT HÓA HỌC BỘ MÔN CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM BÁO CÁO THÍ NGHIỆM PHÂN TÍCH HÓA LÝ THỰ
Views 168 Downloads 49 File size 590KB
Report DMCA / Copyright
DOWNLOAD FILE
Recommend StoriesTRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA TPHCM KHOA KỸ THUẬT HÓA HỌC BỘ MÔN CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM
BÁO CÁO THÍ NGHIỆM PHÂN TÍCH HÓA LÝ THỰC PHẨM
BÀI 2: ĐỊNH LƯỢNG ĐƯỜNG KHỬ - PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ ACID DINITROSALICYLIC [DNS] GVHD: Sinh viên: MSSV: Nhóm: Buổi, ngày TN:
NGUYỄN THỊ LAN PHI Nguyễn Thị Thu Thủy 1613455 6 Chiều thứ Tư, 27/03/2019
TP. HỒ CHÍ MINH, 03/2019
NGUYÊN LÝ THÍ NGHIỆM Đường khử là các đường chứa nhóm aldehyde [-CHO] hoặc ketone [-CO] như glucose, fructose, arabinose, maltose, lactose; trong khi đó saccharose, trehalose không phải đường khử. Phương pháp dựa trên cơ sở phản ứng tạo màu giữa đường khử với thuốc thử acid dinitrosalicylic [DNS]. Phản ứng xảy ra trong môi trường kiềm có gia nhiệt. Cường độ màu của hỗn hợp phản ứng tỷ lệ thuận với nồng độ đường khử trong một phạm vi nhất định. Dựa theo đồ thị đường chuẩn của glucose tinh khiết với thuốc thử DNS sẽ tính được hàm lượng đường khử của mẫu nghiên cứu. Phương trình phản ứng tạo màu giữa đường khử và DNS acid: 1.
2. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH THÍ NGHIỆM 2.1. Mẫu thí nghiệm, thiết bị và dụng cụ Mẫu thí nghiệm: Chuối Thiết bị: Máy quang phổ và bếp điện Hóa chất: o Thuốc thử acid dinitrosalicylic [DNS] o Glucose 0,1% o Rượu 70 80o Dụng cụ: ống nghiệm và giá đựng, bình định mức, cốc, erlen, giấy lọc, 2.2. Tiến hành thí nghiệm 2.2.1. Xử lý mẫu và chuẩn bị dung dịch mẫu Cân chuối bằng cân 4 số lẻ, ta có 𝑚 = 2,5783 𝑔𝑟𝑎𝑚. Cho lượng chuối mới cân vào cốc rồi dùng muỗng để nghiền nhỏ chuối. Vì chuối là nguyên liệu giàu tinh bột nên sẽ được trích ly bằng 30 mL rượu 70 80o. Mẫu qua xử lý thêm nước cất tới vạch định mức 100 mL, lọc qua giấy lọc vào cốc. Nước qua lọc là dung dịch mẫu cần đem đi phân tích. 2.2.2. Dựng đồ thị chuẩn Glucose Dung dịch đường glucose chuẩn: 0.1% Chuẩn bị dãy ống nghiệm theo bảng sau: đơn vị mL Bảng 1. Kết quả thô STT Dung dịch chuẩn Dung dịch mẫu
Ống đối chứng
Ống chuẩn 1
Ống chuẩn 2
Ống chuẩn 3
Ống chuẩn 4
Ống chuẩn 5
0,2
0,4
0,6
0,8
1
Dung dịch mẫu
0,6 1
Nước cất
3
2,8
2,6
2,4
2,2
2
2,4
Thuốc thử DNS
1
1
1
1
1
1
1
Giá trị đo 0,067 0,078 0,088 0,096 0,113 0,122 0,118 OD540nm Đun sôi các ống nghiệm đúng 5 phút [đun cách thủy] Làm nguội đến nhiệt độ phòng rồi đem đi đo mật độ quang [OD] ở bước sóng 540 nm với mẫu đối chứng là ống đối chứng. Lưu ý: Các mẫu đã đun chỉ có thể để được một thời gian khoảng 20 phút trước khi đo mật độ quang. Các mẫu không đun sẽ bị thủy phân dần dần. Những dung dịch đường đậm đặc phải được pha loãng sao cho màu dung dịch nằm lọt trong khoảng dãy màu của ống chuẩn 1 đến 5. 3. KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1. Tính toán kết quả Với các số liệu trong bảng 1, ta vẽ được đường chuẩn Glucose như sau:
Đường chuẩn Glucose với mật độ quang OD540nm 0.14
Mật độ quang OD
0.12 0.1 0.08
y = 0.0554x + 0.0663 R² = 0.9911
0.06 0.04 0.02 0 0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
Glucose 0,1% [mg]
Hàm lượng glucose trong nguyên liệu được tính theo công thức: 𝑋.𝑉.100 G= . fmẫu [%] 1000.𝑚
m: lượng mẫu đem đi thí nghiệm [g] V: thể tích định mức dung dịch thí nghiệm [100ml] X: nồng độ đường khử trong dung dịch mẫu tính theo glucose [mg/ml] fmẫu: hệ số pha loãng mẫu [nếu có]
Dựa vào đường chuẩn, ta tính được: 2
X=
0,1180,0663 0,0554
= 0,9332 [mg/mL] G =
0,9332.100.100 1000.2,5783
. 1 = 3,6194 [%]
3.2. Bàn luận Sai sót trong quá trình thí nghiệm: Thao tác trích ly, lọc sai cách Cuvet khi đo OD dễ bẩn dẫn đến sai số Trong bài thực hành này, chọn đường glucose để dựng đường chuẩn, điều này không luôn đúng vì đường khử trong chuối có nhiều loại, ngoài glucose còn có frutose, lactose, maltose,
3